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产品介绍:
Biorab棉花基因组DNA快速提取试剂盒不含巯基乙醇等刺激性试剂，对于人体无害。
提取的DNA OD260/280一般在1.8以上，纯度高，不含污染和抑制剂，可以直接用于酶切、PCR、real-time PCR、multiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting,microsatellite analysis等各种后续分子生物学实验。
本试剂盒可以有效去除棉花叶片中的多糖多酚，适用于其他多糖多酚含量高的植物样品，水亦适用于其他常见植物样品。
注意事项：
1.裂解液I和纯化液II容易产生沉淀，纯化液II比较粘稠，用前均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低，用前充分摇匀。
2.自备试剂：氯仿。
(一)样品裂解：
1.液氮研磨
a.称取棉花叶片0.1～0.5g左右，剪成微小的碎片，于液氮研磨后将粉末转移至1.5mL的离心管中。
b.在上述离心管中加入0.75mL的经过65℃预热的裂解液I。
(二)样品纯化：
1.在步骤(一)所得的裂解产物中加入0.5倍体积预热的纯化液II，颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。(由于纯化液II比较粘稠，可以将1mL枪头剪去一截再吸取)。
2.65℃水浴3～5分钟。如果室温放置，DNA产量会降低10～20%。
3.加入200μL自备氯仿，震荡混匀10～30秒。
4.12000rpm室温离心2分钟。此时上清液将变得透明，中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的1.5mL塑料离心管中，避免触及中间层的白膜。
(三)基因组DNA收集：
1.在步骤(二)所得的上清中加入1.5倍体积的结合液III，颠倒数次混匀后，分多次上同一DNA吸附柱，每次上柱后均先室温放置2min，然后12000rpm离心1min，倒掉穿透液。
2.在吸附柱中加入500μL洗涤液，12000rpm离心1min，弃穿透液。
3.再将吸附柱12000rpm离心30 s以甩干乙醇。
4.将吸附柱放入一个干净的1.5mL离心管中。在吸附柱中央加入50μL洗脱液(65～70℃预热)，室温静置5min。12000rpm离心2min。将穿透液重新加入吸附柱中央，12000rpm离心1min以洗脱更多基因组DNA。
5.检测DNA质量。将所得的基因组DNA保存于-20℃冰箱。
相关搜索：棉花基因组DNA提取试剂盒，Cotton gDNA Extract kit